摘要

目的 构建KDM4B敲除的人结肠癌HCT116和SW260细胞,研究KDM4B对结肠癌细胞迁移与侵袭的影响并探讨其机制。方法 利用免疫组化染色,检测临床组织样本KDM4B的表达量;利用CRISPR/Cas9技术,通过慢病毒侵染HCT116与SW260细胞,构建KDM4B敲除细胞系;利用细胞划痕实验及transwell小室实验评价KDM4B敲除细胞与野生型细胞迁移及侵袭能力的差异;利用Western blotting检测EMT标志蛋白E-cadherin、 N-cadherin和Vimentin的表达情况。结果 免疫组化表明结肠癌组织中KDM4B显著高表达;通过Western blotting成功验证了KDM4B敲除结肠癌细胞系;敲除KDM4B显著抑制HCT116及SW260细胞的迁移与侵袭;敲除KDM4B显著上调HCT116及SW260细胞中E-cadherin的表达,显著下调N-cadherin和Vimentin的表达。结论 KDM4B能够通过介导EMT促进结肠癌细胞HCT116和SW260的迁移与侵袭,将其敲除可以显著减弱这种作用。

  • 出版日期2022
  • 单位黄冈市中心医院