龋齿致病菌变形链球菌蛋白Smu.260的制备、结晶及初级晶体学分析(英文)

作者:张晓嫣; 米伟; 周艳峰; 刘翔宇; 李兰芬; 梁宇和; 魏世成; 苏晓东
来源:生物化学与生物物理进展, 2005, (03): 217-220.

摘要

变形链球菌(Streptococcusmutans) 是最主要的龋齿致病菌,其基因Smu.260编码一个约23 ku (200个氨基酸) 的蛋白质. Smu.260的DNA片段被克隆到表达载体pET28a后在大肠杆菌BL21(DE3)菌株中表达得到很好的产量. 产物Smu.260蛋白通过Ni2+亲和柱和分子筛两步法纯化,并发现纯化后的蛋白以两种形式存在,二聚体(约46 ku) 和四聚体,前者呈亮黄色,后者无色。采用悬滴气象扩散法得到了二聚体形式的晶体. 晶体的X射线衍射分辨率达到2.3 魡,晶体属正交空间群P212121,晶格参数为a=89.88 魡, b=90.91 魡, c=105.17 魡. 晶胞不对称单元内估计含有一个二聚体,溶剂含量为53%.