定量RT-PCR方法检测衰老大鼠肾脏PAI-1基因的表达

作者：吕杨; 洪权; 陈香美; 张利; 刘航; 侯剀

来源：中华老年医学杂志, 2003, (03): 43-46.

• 肾
• 纤溶酶原激活物抑制物1

目的　采用SYBR绿色荧光染料Ⅰ (SYBRGREENⅠ )定量PCR法 ,对来源珍贵的微量组织中的基因进行检测 ,并对其可行性及适用性进行研究。　方法　取 2 4月龄的老年大鼠、3月龄青年大鼠各 6只 ,提取其肾脏组织的RNA ,采用SYBRGREENI实时检测的逆转录 聚合酶链反应(RT PCR)检测纤溶酶系活化剂抑制物 1(PAI 1)基因的表达 ,并用磷酸甘油醛脱氢酶 (G3PDH)作为外参。　结果　标准曲线有良好的相关性 (R2 >0 99) ,PCR产物特异 ,将PAI 1的拷贝数与G3PDH的拷贝数相除 ,青年大鼠肾脏PAI 1表达水平为 (1 2 7± 0 90 )× 10 -3,老年大鼠肾脏PAI 1表达水平为 (3 84± 2 0 0 )× 10 -3,两者比较 ,差异有显著性 (P <0 0 5 )。　结论　只要严格控制PCR反应条件 ,SYBRGREENⅠ定量PCR法可以作为一种良好的定量PCR方法对来源珍贵的微量组织的基因表达进行检测 ,并证实了老年大鼠肾脏PAI 1表达水平明显增加

• 出版日期2003
• 单位解放军总医院