A型肉毒梭菌atx基因TaqMan探针荧光定量PCR检测

作者：王春晖; 赵素慧; 韦耀; 周莹; 万成松

来源：中国公共卫生, 2012, (06): 863-865.

• 肉毒梭菌
• TaqMan探针
• atx基因
• 荧光定量PCR Clostridium botulinum
• TaqMan probe
• atx gene
• fluorescence quantitative PCR

目的采用TaqMan探针荧光定量PCR方法对A型肉毒梭菌atx基因进行检测。方法以atx基因为靶基因,设计引物和TaqMan探针,优化反应条件,制作定量标准曲线,进行灵敏度、特异性和重复性验证,建立A型肉毒梭菌TaqMan荧光定量PCR检测方法。结果构建质粒pUC57-△atx,标准曲线在103～107拷贝数之间有较好的线性关系,相关系数为0.997,灵敏度达到22个拷贝数,比普通PCR提高约100倍;能选择性检测A型肉毒梭菌,与其他5种食源性病原菌无交叉反应,结果与普通PCR一致;重复性试验表明,同一浓度的15个平行样品的变异系数为1.0%。结论 A型肉毒梭菌TaqMan探针荧光定量PCR方...

• 出版日期2012
• 单位南方医科大学