重组组蛋白去乙酰化酶2-pEGFP-C2质粒的构建及表达

作者：章慧; 黄成; 卞尔保; 赵斌; 吴宝明; 刘昌伟; 陈小霞; 李俊

来源：中国药理学通报, 2014, (06): 812-816.

• 组蛋白去乙酰化酶2
• COS-7
• 融合蛋白
• pEGFP-C2 HepG2
• 绿色荧光蛋白 HDAC2
• COS-7
• fusion protein
• pEGFP-C2
• HepG2
• GFP

目的将组蛋白去乙酰化酶2(HDAC2)基因克隆入pEGFP-C2载体,探讨构建的质粒转染进非洲绿猴肾成纤维细胞COS-7株相关蛋白和mRNA的表达及蛋白分布部位的情况。方法从人肝癌细胞(HepG2)中获得组蛋白去乙酰化酶2(HDAC2)的cDNA,采用Xho I和BamH I双酶切,用T4连接酶将该cDNA连接pEGFP-C2质粒,将构建成功的pEGFP-C2-HDAC2质粒经PCR、限制性内切酶酶切和测序鉴定后转染非洲绿猴肾成纤维细胞(COS-7),荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白表达,RT-PCR和Western blot鉴定HDAC2的表达。结果双酶切鉴定可见HDAC2质粒片段,转染重组质粒...

• 出版日期2014
• 单位安徽医科大学