一个可能的与人端粒结合因子相互作用蛋白Tara的分离和克隆

作者：蓝建平; 罗依; 朱园园; 孙洁; 来晓瑜; 李静远; 余建; 施继敏; 林茂芳; 黄河

来源：浙江大学学报(医学版), 2004, 33(06): 21-25.

DOI：10.3785/j.issn.1008-9292.2004.06.004

• 端粒
• 蛋白质类/分析
• 端粒结合因子
• 基因,Tara
• 免疫共沉淀
• 质谱

目的 :分离和鉴定端粒结合因子 (TRF1)免疫共沉淀蛋白复合物并克隆其基因。方法 :以 TRF1抗体应用免疫共沉淀方法 ,从细胞蛋白抽提物中分离 TRF1蛋白复合物 ,并作蛋白质肽指纹谱鉴定 ;应用温度梯度 PCR,从人 c DNA文库中扩增目的基因 ,并构建 p EGFP- C2真核表达载体 ;核苷酸测序和 Western blot验证目的基因序列和表达载体。结果 :从 TRF1免疫沉淀复合物中分离出了 Tara蛋白 ;人 c DNA文库中 PCR扩增所得产物为 1.7kb,与 Tara基因 CDS序列同源性为 99.9% ;GFP/ Tara融合蛋白约 10 0 k D,Tara在间期 He La细胞中弥散表达于胞浆 ,而有丝分裂细胞则定位于整个细胞。结论 :Tara是一个可能的 TRF1相互作用蛋白 ,其作用机制需进一步实验研究。

• 出版日期2004
• 单位浙江大学医学院附属第一医院