艾灸与针刺对局部穴区组织免疫及代谢调节机制的对比研究

作者：钟欢

来源：博士, 湖南中医药大学, 2017.

• 艾灸
• 针刺
• 代谢组学
• 穴区组织
• 差异性研究

目的:1.观察艾灸与针刺对生理状态及CAG病理状态下大鼠局部穴区组织免疫细胞的影响;2.观察艾灸与针刺对生理状态及CAG病理状态下大鼠局部穴区组织免疫相关因子的影响;3.观察艾灸与针刺对生理状态及CAG病理状态下大鼠局部穴区组织代谢的影响;4.从细胞、蛋白、代谢物层面探讨艾灸与针刺对生理状态及CAG病理状态大鼠局部穴区组织的差异性调节作用;5.总结艾灸与针刺对生理状态及CAG病理状态下局部穴区组织的共性与特性作用。方法:1.通过MNNG联合多因素复制CAG模型大鼠,以艾灸和针刺作为干预手段,设置正常组、正常+灸组、正常+针组、模型组、模型+灸组、模型+针组,按照各组施加的被试因素进行干预,HE染色观察各组大鼠胃组织病理学特点,甲苯胺蓝染色观察局部穴区组织肥大细胞的含量,免疫组化法检测梅克尔细胞特异性标记蛋白的含量;2.免疫组化法检测局部穴区组织中神经肽（SP、NPY、CGRP、缓激肽）、组胺受体、炎症因子（IL-1β、IL-6、IL-10、IL-18、TNF-α）的含量;3.利用核磁共振氢谱技术（1H NMR）检测局部穴区组织中代谢物的变化,通过PCA、PLS-DA、OPLS-DA等分析方法对局部穴区组织做代谢模式、差异性代谢物分析。结果:1.模型+灸组与模型+针组“足三里”穴区肥大细胞数量要多于模型组,模型+灸组显著高于模型组,两者均数比较P<0.05,差异具有统计学意义。正常大鼠接受艾灸或针刺干预足三里后穴区组织肥大细胞也有增多趋势,艾灸组同样具有显著差异,P<0.05。无论在CAG病理状态还是在正常生理状态上,艾灸与针刺对“足三里”穴区组织梅克尔细胞功能有显著影响且有一定的差异。在CAG病理状态下,针刺能显著提高局部穴区组织梅克尔细胞角蛋白CK18的表达（P<0.05）,艾灸则能显著提高局部穴区组织梅克尔细胞角蛋白CK20的表达（P<0.05）。而在正常生理状态下,针刺与艾灸对局部穴区组织梅克尔细胞角蛋白CK18的表达则以抑制为主（P<0.05;P<0.05）,然而艾灸却能显著提高局部穴区组织梅克尔细胞角蛋白CK20的表达（P<0.05）,这点与CAG病理状态下的艾灸的调节作用一致。2.艾灸与针刺两种刺激方式对局部“足三里”穴区组织神经肽的表达有不同的影响,艾灸对局部“足三里”穴区组织NPY、缓激肽有显著影响（P<0.05;P<0.01）,且这种变化在CAG病理状态和生理状态一致。针刺对局部“足三里”穴区组织CGRP、SP有显著影响（P<0.05;P<0.01）,且这种变化在CAG病理状态和生理状态一致。艾灸与针刺在生理状态下均能显著提升局部穴区组织组胺受体的表达,而在CAG病理状态下针刺能显著降低局部穴区组织组胺受体的表达P<0.05。在CAG病理状态下“足三里”部穴区组织处于炎症状态,艾灸作用可增强炎症的程度,针刺能降低炎症状态。3.艾灸与针刺两种刺激方式对局部“足三里”穴区组织代谢有不同的影响,艾灸影响了局部组织的能量代谢、糖酵解、核酸代谢、牛磺酸代谢、磷酸胆碱代谢。针刺主要影响了局部组织的能量代谢、氨基酸代谢、核酸代谢和糖酵解。在CAG病理状态下局部“足三里”穴区组织代谢发生了紊乱,主要表现在神经递质代谢紊乱和能量代谢紊乱。艾灸干预后主要调节了局部穴区组织紊乱的神经递质,对能量代谢也起到了调节作用;针刺干预后主要调节了局部穴区组织神经递质的代谢紊乱状态。结论:1.艾灸与针刺对局部穴区组织免疫细胞的调节存在差异,艾灸与针刺均能促进局部穴区组织免疫细胞的聚集,艾灸作用强于针刺。2.生理状态下艾灸与针刺均通过上调局部穴区组织神经肽、炎症因子起到生物学效应。3.病理状态下,艾灸对穴区组织炎症因子的上调作用可能为艾灸作用的部分生物学机制;针刺对穴区组织炎症因子的下调作用可能为针刺作用的部分生物学机制。4.生理状态下,艾灸倾向于促进局部组织细胞的凋亡,针刺倾向于神经递质的调控。5.病理状态下,艾灸对局部穴区组织中紊乱的神经递质及能量代谢有调控作用,而针刺主要调控了局部穴区组织中紊乱的神经递质。

• 出版日期2017
• 单位湖南中医药大学