大肠杆菌ptsG基因敲除及其缺陷株生长特性研究

作者：韩聪张惟材游松黄留玉

来源：生物工程学报, 2004, (01): 16-20.

• Red同源重组
• ptsG基因
• 基因敲除
• 代谢工程 Red homologous recombination
• ptsG gene
• gene knock-out
• metabolic engineering

在大肠杆菌磷酸转移酶系统中 ,葡萄糖主要由ptsG基因编码的酶ⅡCBGlc转运入细胞。利用代谢工程技术构建ptsG基因缺陷株 ,有望降低葡萄糖的摄取速率 ,减少乙酸累积 ,促进菌体生长。运用PCR技术 ,扩增出两翼与ptsG基因上下游序列同源 ,中间为氯霉素抗性基因的DNA片段。经电转化 ,将外源DNA片段分别转入EscherichiacoliDH5α、JM10 9中。在Red重组酶的作用下 ,外源DNA片段与染色体上同源区域重组 ,将基因ptsG敲除 ,构建ptsG基因缺陷株DH5αP、JM10 9P。在LB培养基中 ,ptsG基因缺陷株的生长状况与亲株无明显差异。在含有葡萄糖的LB培养基中...

• 出版日期2004
• 单位沈阳药科大学; 中国人民解放军军事医学科学院