低温诱导东乡野生稻幼苗期叶片cDNA文库的构建和鉴定

作者：李玲龙; 邢俊杰; 崔玲玲; 韩小霞; 阳志刚; 李丁; 谢灵灵; 曹孟良

来源：杂交水稻, 2010, (02): 59-62+77.

DOI：10.16267/j.cnki.1005-3956.2010.02.025

• 东乡野生稻
• 低温诱导
• cDNA文库构建
• SMART技术 Dongxiang wild rice
• low temperature induction
• cDNA library construction
• SMART
• LD-PCR

从8℃低温诱导的东乡野生稻幼叶中提取总RNA,以总RNA为模板,利用SMART技术合成第1链,再经LD-PCR扩增合成第2链后,将获得的双链cDNA与双元表达载体YPL3连接,重组质粒电转入大肠杆菌,成功构建了东乡野生稻cDNA文库。经测定,原始文库滴度平均为4.4×107cfu/mL,平均插入片段约1kb,重组率为100%,符合cDNA文库构建要求,为后续利用酵母功能互补技术筛选东乡野生稻有利基因奠定了基础。

• 出版日期2010
• 单位中南大学