circRNA＿0051079通过靶向miR-26a-5p/PTEN轴诱导视网膜神经变性的分子机制

作者：李玉平; 王伶俐^*; 陈震; 宋辉; 姚为华; 刘易

来源：眼科新进展, 2023, 43(05): 363-368.

DOI：10.13389/j.cnki.rao.2023.0073

• 视网膜缺血
• 缺血/再灌注
• 环状RNA
• miR-26a-5p/PTEN通路
• 视网膜神经变性

目的 探讨circ＿0051079对缺血/再灌注(I/R)损伤诱导的视网膜神经变性的影响及机制。方法 从C57BL/6J乳鼠眼球中分离视网膜神经节细胞(RGC),随机分为对照组、siRNA组(转染阴性siRNA)、si＿circ＿0051079组(转染si-circ-0051079干扰RNA)、模拟物对照组(转染Scr mimic)、miR-26a-5p组(转染miR-26a-5p mimic)、miR-26a-5p+vector组(转染pcDNA 3.1)、miR-26a-5p+PTEN组(转染pcDNA 3.1-PTEN),分别在正常、缺氧(体积分数1%O2暴露)或氧化应激(50μmol·L-1H2O2暴露)条件下培养24 h,进行RT-qPCR、CCK-8、TUNEL、RNA免疫沉淀(RIP)等检测。于15只C57BL/6小鼠左眼中建立I/R损伤模型，对侧眼保持正常眼压作为对照，I/R损伤后0 d、3 d和7 d各取5只小鼠收集视网膜检测circ＿0051079表达。另取20只C57BL/6小鼠分为正常对照组(用针头插入左眼前房但不升高眼压)、I/R组(左眼I/R损伤处理)、I/R+对照shRNA组(左眼注射无序shRNA并建立I/R损伤模型)、I/R+circ＿0051079 shRNA组(左眼注射circ＿0051079 shRNA并建立I/R损伤模型)。I/R损伤后7 d,取视网膜进行蛋白免疫荧光染色。收集2020年11月至2021年3月急性闭角型青光眼和白内障患者的房水样本各20例，进行RT-qPCR测定。结果 缺氧或氧化应激条件下培养的RGC中circ＿0051079表达量较正常条件下培养的RGC增加(均为P<0.05)。在缺氧或氧化应激条件下培养，si＿circ＿0051079组RGC细胞活力均较siRNA组增加，RGC凋亡细胞数均减少(均为P<0.05)。荧光素酶报告基因分析和RIP检测结果表明，circ＿0051079可以通过调节miR-26a-3p/PTEN信号转导进而影响RGC功能。动物实验中，I/R损伤可致视网膜组织中circ＿0051079表达量升高(P<0.05)。与正常对照组(1.00±0.07)相比，I/R+circ＿0051079 shRNA组小鼠视网膜中circ＿0051079表达水平(0.37±0.04)下降(P<0.05),同时I/R诱导的视网膜神经变性减轻。临床研究中，与白内障患者房水样本相比，青光眼患者房水样本中circ＿0051079和PTEN mRNA表达增加，miR-26a-3p表达降低(均为P<0.001)。结论 circ＿0051079可能是缺血性视网膜病变诊断和治疗的潜在靶点。

• 出版日期2023
• 单位湖北省人民医院; 黄冈市中心医院; 麻城市人民医院