枸杞多糖对力竭运动大鼠骨骼肌的保护作用及其相关机制研究

作者:胡小辉; 王莉; 薛姝婧; 朱玲勤; 李光华*
来源:宁夏医科大学学报, 2020, 42(03): 248-254.
DOI:10.16050/j.cnki.issn1674-6309.2020.03.006

摘要

目的探讨枸杞多糖对力竭运动大鼠骨骼肌的保护作用及Keap1/Nrf2通路相关蛋白的表达情况。方法实验研究选用雄性SD大鼠60只,分为:正常对照组(A)、有氧运动组(B)、力竭运动组(C)和力竭运动+LBP组(D)。除对照组外其余3组分别进行35天游泳运动训练,C、D两组在最后一次游泳结束后,继续游泳至力竭以此建立力竭运动模型。HE染色观察骨骼肌组织形态结构的改变。TUNEL染色观察骨骼肌细胞凋亡。蛋白免疫印迹实验检测肿瘤坏死因子(TNF-α)、KeIcH样环氧氯丙烷相关蛋白-1(Keap1)、核因子E2相关因子2(Nrf2)、血红素加氧酶1(HO-1)、谷氨酸-半胱氨酸连接酶修饰亚基(GCLM)的蛋白表达水平。免疫组织化学染色观察TNF-α、Keap1、Nrf2、HO-1、GCLM因子的阳性表达。结果 HE染色结果显示,与正常对照组比较,有氧运动组骨骼肌纤维排列整齐,无变化;与有氧运动组比较,力竭运动组大鼠骨骼肌纤维溶解,排列紊乱;与力竭运动组比较,力竭运动+LBP组骨骼肌纤维排列较整齐,细胞核分布较均匀。TUNEL染色结果显示,与对照组比较,有氧运动组骨骼肌细胞凋亡轻微增加;与有氧运动组比较,力竭运动组骨骼肌细胞凋亡明显增加;与力竭运动组比较,力竭运动+LBP组骨骼肌细胞凋亡减少。蛋白免疫印迹实验结果显示,与正常对照组比较,有氧运动组TNF-α和Keap1蛋白表达差异均无统计学意义(P均>0.05),Nrf2、HO-1和GCLM蛋白表达升高(P<0.01或<0.05);与有氧运动组比较,力竭运动组TNF-α和Nrf2蛋白表达升高(P<0.01或<0.05),Keap1、HO-1和GCLM蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05);与力竭运动组比较,力竭运动+LBP组TNF-α和Keap1蛋白表达下降(P<0.01或<0.05),Nrf2、HO-1和GCLM蛋白表达升高(P<0.01或<0.05)。免疫组织化学染色结果显示,与正常对照组比较,有氧运动组TNF-α、Keap1、Nrf2、GCLM和HO-1棕黄色阳性区域表达增加;与有氧运动组比较,力竭运动组TNF-α阳性表达明显增加,Keap1、Nrf2、HO-1、GCLM阳性表达减少;与力竭运动组比较,力竭运动+LBP组TNF-α、Keap1阳性表达减少,Nrf2、HO-1和GCLM阳性表达增加。结论 LBP可改善骨骼肌损伤,对骨骼肌起到保护作用,其机制与增强Keap1/Nrf2抗氧化应激信号通路有关。