siRNA对VEGFR_2的表达抑制及对HL60细胞和人内皮细胞的影响

作者：郭海霞; 薛红漫; 夏焱; 徐令; 徐宏贵; 李文益

来源：中山大学学报(医学科学版), 2006, 27(03): 276-280.

DOI：10.3321/j.issn:1672-3554.2006.03.009

• siRNA
• VEGFR2
• HL60细胞
• EC

目的为探索治疗白血病的新思路研究了小干扰RNA(siRNA)对肿瘤细胞株HL60和人血管内皮细胞(EC)株EA.hy926血管内皮细胞生长因子受体2(VEGFR2)基因表达的抑制作用。方法制备并筛选VEGFR2基因的最有效siRNA,并据此设计shRNA寡核苷酸链,构建pENTRTM/U6干扰表达载体。瞬时转染细胞,采用MTT法、RT-PCR法及Westernblot测定VEGFR2表达抑制情况。结果VEGFR2siRNAa、b、c抑制HL60细胞效率分别为77.5%、45.0%、80.9%,以siRNAc最高,利用其shRNA和pENTRTM/U6构建的入门克隆转染HL60,抑制细胞效率达99.1%;此入门克隆对VEGFR2基因mRNA和蛋白的表达抑制在HL60和EA.hy926细胞均显著。结论在体外shRNA表达载体可有效抑制HL60细胞VEGFR2自分泌和旁分泌,有效抑制白血病细胞生长。

• 出版日期2006-5-30
• 单位中山大学