摘要

目的本文拟以外排转运蛋白中的多药耐药蛋白1(multi-drug resistance protein 1,MDR1)为代表,研究其在人角膜上皮、C57BL/6小鼠角膜上皮、C57BL/6小鼠腹腔注射链尿佐菌素(Streptozocin,STZ)诱导Ⅰ型糖尿病动物模型不同糖尿病病程角膜上皮中的表达与分布差异,为眼部外排转运蛋白表达与功能调控研究提供基础数据。方法 PCR、免疫组化/免疫荧光、Western Blotting分别从基因与蛋白水平检测各组织内MDR1的表达,同时还检测了人角膜上皮细胞系(HCEC)中MDR1的表达。结果在基因水平,MDR1在人角膜上皮中表达仅为(9.11±2.33)Qty·ng-1 RNA,HCEC则未检测到表达,MDR1在C57BL/6小鼠角膜上皮中则有较强的表达,但是与正常组相比,STZ小鼠角膜上皮中的MDR1表达在建模4周、12周和24周均呈现显著下降(P<0.05),正常小鼠和STZ模型小鼠随着鼠龄的增长,角膜上皮中的MDR1基因表达也均呈现出显著下降的趋势(P<0.05)。Western Blotting结果表明MDR1在人角膜上皮组织内表达,但表达量很低,MDR1在HCEC细胞内明显表达,在Ⅰ型糖尿病动物模型小鼠角膜上皮中表达但是变化趋势同基因表达变化趋势一致;免疫组化/荧光检测结果表明MDR1人角膜全层部分上皮细胞细胞核核周表达,在HCEC细胞中有表达,其表达部位均位于整个胞浆,MDR1在小鼠角膜组织内表达,且与空白组相比,STZ组小鼠角膜MDR1表达下降。结论人角膜上皮组织中MDR1表达与C57BL/6小鼠存在较大差异,且随着鼠龄增长MDR1表达也呈下降趋势,如基于C57BL/6小鼠等动物进行MDR1外排转运蛋白的研究和调控有可能偏离人组织的实际表达情况而得到错误结论。