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摘要
目的 中性粒细胞作为机体对抗细菌感染时的第一道免疫防线，发挥了重要的防御功能。本文探索依替米星在治疗斑马鱼感染过程中，对中性粒细胞增殖和功能的影响。方法 采用斑马鱼胚胎心包腔内注射方法，考察不同细菌负载量对斑马鱼生存率的影响，建立感染模型；通过考察斑马鱼生存率及体内细菌清除情况，确定依替米星的体内治疗浓度；将表达红色荧光蛋白的大肠埃希菌与绿色荧光标记中性粒细胞的转基因斑马鱼Tg(mpx:GFP)结合，通过苏丹黑染色观察中性粒细胞的颗粒，通过多色荧光成像和细胞计数观察细菌与中性粒细胞的动态变化，并统计分析依替米星对中性粒细胞的增殖、趋化及脱颗粒的影响。结果 通过心包腔注射大肠埃希菌1000 CFU/胚胎，建立斑马鱼感染模型；确定依替米星治疗浓度为4 mmol/L，该浓度下感染斑马鱼24 hpi的生存率显著提高，体内的活菌数及细菌荧光强度显著降低，趋化因子IL-8转录水平是感染组的1/3，心包腔部位中性粒细胞“+++”等级的斑马鱼占比是感染组的1/4，体内总中性粒细胞数量和脱颗粒比例占比略有下降，但不显著。结论依替米星在斑马鱼感染过程中，可有效清除心包腔部位的细菌，提高斑马鱼生存率，并且显著抑制趋化因子IL-8诱导的中性粒细胞趋化，避免其在炎症部位聚集，减轻过度炎症反应对机体的损伤，但对中性粒细胞增殖和脱颗粒的影响不显著。
- 出版日期2023
- 单位上海交通大学
