杜仲Fls基因的克隆及原核表达

作者：常立; 李周岐; 李煜; 魏军坤; 王淑惠

来源：西北农林科技大学学报(自然科学版), 2014, (04): 102-108+116.

• 杜仲
• 基因克隆
• Fls基因
• 原核表达 Eucommia ulmoides Oliver
• gene cloning
• Fls gene
• prokaryotic expression

【目的】克隆杜仲黄酮醇合成酶基因(Fls)全长,对其开放阅读框(ORF)进行原核表达分析。【方法】以杜仲叶片为材料提取总RNA,采用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和cDNA末端快速扩增(RACE)技术克隆杜仲Fls基因;Fls基因的ORF经限制性内切酶酶切,构建其原核表达载体pET-28a-Fls;最后利用IPTG诱导Fls基因在大肠杆菌BL21(DE3)中表达。【结果】获得了黄酮醇合成酶基因全长序列,长度为1 220bp,ORF为1 011bp,编码336个氨基酸;成功构建了原核表达载体pET-28a-Fls;利用IPTG诱导Fls在BL21(DE3)中表达,SDS-PAGE电泳结果显...

• 出版日期2014-3-26
• 单位西北农林科技大学