分枝杆菌Mycobacterium Neoaurum NwIB-01 3-甾酮-Δ~1-脱氢酶基因的克隆表达

作者：张成刚; 王风清; 魏东芝

来源：化学与生物工程, 2011, (07): 39-43.

• 3-甾酮-Δ1-脱氢酶
• 分枝杆菌
• 染色体走读 3-ketosteroid-Δ1-dehydrogenase
• Mycobacterium
• genome walking

通过分析已知两种分枝杆菌的3-甾酮-Δ1-脱氢酶(kstD)碱基保守序列,设计简并引物,以甾醇降解菌株Mycobacterium neoaurumNwIB-01的DNA作模板,得到一个kstD基因片段,通过染色体走读,得到其完整的阅读框。以pUC18为异源表达载体,构建pTQ002表达质粒,在E.coliDH5α中对kstD进行了胞内活性表达,测定Mycobacteri-um neoaurumNwIB-01 kstD酶活为(0.37±0.05)U.mL-1,约为原酶活的一半,为构建高效转化生成3-酮基-1,4-二烯类固醇的基因工程菌奠定了基础。

• 出版日期2011
• 单位华东理工大学