Ana-1巨噬细胞分泌exosomes的提取及免疫鉴定

作者:王桂花; 周向梅; 尹晓敏; 杨利锋; 周海云; 张交儿; 刘爱林; 赵德明
来源:细胞与分子免疫学杂志, 2010, (01): 84-85+88.
DOI:10.13423/j.cnki.cjcmi.005323

摘要

目的:为了证实Ana-1巨噬细胞是否分泌exo-somes。方法:采用分级离心的方法,从Ana-1巨噬细胞培养的上清液提取exosomes。样品用醋酸双氧铀负染,在透射电镜下观察其形态、大小;并分别用Flotillin多克隆抗体、Tsg101单克隆抗体(mAb)、Hsp70mAb和calnexin多克隆抗体,通过免疫印迹法和免疫金标记法进行免疫鉴定。结果:电镜下可以观察到提取的exosomes平均大小为50~100nm。免疫印迹法分析结果显示,提取的exosomes表达Flotillin、Tsg101和Hsp70蛋白,相对分子质量(Mr)分别为45000、43000和70000,但不表达cal...

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