发热伴血小板减少综合征布尼亚病毒非结构蛋白NSs的原核表达及初步鉴定

作者：张文帅; 张黎; 温恬; 迟莹; 黄超; 曾晓燕; 焦永军

来源：江苏预防医学, 2015, 26(03): 12-15.

DOI：10.13668/j.issn.1006-9070.2015.03.004

• 发热伴血小板减少综合征病毒(SFTSV)
• 非结构蛋白(NSs)
• 原核表达
• 功能鉴定

目的克隆、表达发热伴血小板减少综合征布尼亚病毒(SFTSV)非结构蛋白NSs,对其功能初步鉴定。方法采用PCR法扩增经密码子优化后的SFTSV NSs基因,并克隆至PGEX-4T-2载体中,构建原核表达载体PGEX-4T-2-NSs,经酶切、测序鉴定后转化表达菌BL21(DE3),再经诱导、纯化得到谷胱甘肽S-转移酶(GST)-NSs融合蛋白,用Western Blot验证融合蛋白GST-NSs的抗原性。结果成功构建了GST-NSs融合蛋白原核表达载体,并在BL21细菌中获得高效表达;纯化后的融合蛋白具有良好的抗原性。结论实现了SFTSV重组NSs蛋白的原核高效表达,为进一步深入研究其结构与功能奠定了基础。

• 出版日期2015
• 单位江苏省疾病预防控制中心