过表达BMP-12的兔BM-MSCs在3D打印PLGA支架上的增殖与分化特性研究

作者:崔磊; 陈鹏; 张文涛; 谢小肖; 李伟; 江长青*
来源:实用手外科杂志, 2021, 35(03): 368-374.
DOI:10.3969/j.issn.1671-2722.2021.03.030

摘要

目的探讨过表达骨形态发生蛋白-12(Bone Morphogenic Protein 12, BMP-12)的兔骨髓间充质干细胞(Bone Marrow-derived Mesenchymal Stem Cells, BM-MSCs)在3D打印聚乳酸-羟基乙酸(Polylactic-co-glycolic Acid, PLGA)支架上的增殖与分化特性。方法采用3D打印技术制备PLGA支架,并检测其降解性能,分离、培养兔BM-MSCs,使用BMP-12重组腺病毒表达载体转染兔BMMSCs,并将其种植在PLGA支架上,检测支架的细胞毒性及种植的细胞在支架上的增殖活性,通过实时荧光定量PCR和Westernblot技术检测种子细胞Ⅰ型胶原蛋白、Ⅲ型胶原蛋白、BMP-12、SCX、Tnmd、Tnc的基因和蛋白表达水平。结果 PLGA支架具有良好的生物相容性和生物可降解性。在种植了过表达BMP-12的BM-MSCs的3 D打印PLGA支架上,BM-MSCs的Ⅰ型胶原蛋白、Ⅲ型胶原蛋白、BMP-12、SCX、Tnmd、Tnc的mRNA和蛋白表达水平显著升高。结论本研究结果提示,在携带过表达BMP-12的BM-MSCs的3 D打印PLGA支架上,BMP-12的过表达促进了BM-MSCs的腱向分化。携带过表达BMP-12的BM-MSCs的PLGA支架可以为肌腱损伤修复提供一种新的治疗方法。

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