绿盲蝽水溶性海藻糖酶ALTre-1基因原核表达、纯化与酶学特性

作者：谭永安; 肖留斌; 孙洋; 柏立新

来源：中国农业科学, 2013, (17): 3587-3593.

• 绿盲蝽
• 水溶性海藻糖酶
• 原核表达
• 酶学特性 Apolygus lucorum
• soluble trehalase
• prokaryotic expression
• enzymatic characteristic

【目的】在前期克隆了绿盲蝽水溶性海藻糖酶(ALTre-1)基因的基础上,以获得具有酶活性的重组蛋白,明确酶促反应的最佳pH值及最适温度,为绿盲蝽海藻糖酶分子调控机制及其抑制剂的应用研究奠定基础。【方法】将含有绿盲蝽ALTre-1基因的T载体经Nde I和Not I双酶切,构建ALTre-1基因原核表达载体(pET28a-ALTre-1),表达载体经诱导表达和蛋白纯化,获得ALTre-1功能区纯化蛋白。在蛋白浓度为0.3 mg·mL-1的条件下,以海藻糖为底物,对纯化得到的重组Tre-1蛋白进行活性检测,确定其酶促反应的最佳pH值和最佳温度。【结果】ALTre-1基因在大肠杆菌中BL21中能够高...

• 出版日期2013
• 单位江苏省农业科学院