拟南芥AtTR1相互作用蛋白质筛选和鉴定

作者：朱旭辉; 黄奎; 姚润东; 彭露; 裴林森; 刘志斌; 王健美

来源：四川大学学报(自然科学版), 2018, 55(02): 419-424.

• 拟南芥
• E3连接酶AtTR1
• 酵母双杂交
• 类囊体膜曲率相关蛋白1C
• 蔗糖转运蛋白5

本研究利用酵母双杂交系统筛选与E3连接酶AtTR1存在相互作用的靶蛋白.首先,根据AtTR1所含有的结构域,我们对其进行了不同程度的截断以及点突变处理,以验证其各个片段的自激活活性和毒性.最终我们选取AtTR1-△119为诱饵蛋白对拟南芥归一化通用型cDNA文库进行筛选.结果初步获得了13个与其有潜在互作的候选蛋白.经酵母正向和反向多次验证发现转化了AtTR1与CURT1C和AtTR1与SWEET5的酵母在三缺和四缺培养基中均正常生长,而且在含有X-α-gal的培养基中出现蓝斑.双分子荧光互补技术也证明AtTR1与CURT1C或SWEET5之间也有相互作用.

• 出版日期2018
• 单位四川大学; 生命科学学院; 生物资源与生态环境教育部重点实验室