马尔他布氏杆菌divK基因的克隆与原核表达

作者：李亚颖; 冯飞; 庞峰; 李国华; 赵天靖; 彭冬梅; 朱华培; 徐开莲; 朱姝; 杨小健; 聂鑫; 曹瑞勇; 王凤阳; 杜丽

来源：中国兽医科学, 2016, (07): 890-893.

DOI：10.16656/j.issn.1673-4696.2016.07.015

• 马尔他布氏杆菌
• divK基因
• 克隆
• 原核表达 Brucella melitensis
• divK gene
• cloning
• prokaryotic expression

为了克隆马尔他布氏杆菌M 5-90株divK基因并对其进行原核表达,根据GenBank中M5-90株divK基因序列,设计了1对引物;以此菌株的基因组为模板,用设计的引物扩增出了372 bp的基因片段。用凝胶回收纯化目的基因片段,并将其与pMD 20-T载体连接,转化大肠杆菌(E.coli)DH 5α后测序;测序正确后将此基因片段克隆到pET-28a(+),构建重组质粒pET28a(+)-divK;然后,把构建好的重组质粒转化入E.coli BL 21(DE3)。1 mmol/L IPTG诱导后,SDS-PAGE和Western-blot分析的结果表明,诱导表达的蛋白与目的蛋白的大小一致,说明...

• 出版日期2016
• 单位海南大学; 海南省畜牧技术推广站