去除Etag标记的抗CD3/抗Pgp微型双功能抗体原核表达载体的构建及表达

作者：刘娟妮; 高瀛岱; 王金宏; 邵晓枫; 范冬梅; 纪庆; 熊冬生; 杨纯正

来源：细胞与分子免疫学杂志, 2007, (10): 946-949.

DOI：10.13423/j.cnki.cjcmi.004403

• Pgp
• CD3
• Diabody
• 基因工程抗体 Pgp
• CD3
• diabody
• engineering antibody

目的:构建和表达不带Etag标记的抗CD3/抗Pgp微型双功能抗体(Diabody[CD3×Pgp]),并测定其生物学活性。方法:利用PCR方法构建不带Etag的Diabody[CD3×Pgp]原核表达载体,进行原核表达,制备抗抗CD3scFv亲和层析柱进行纯化,SDS-PAGE鉴定。通过间接免疫荧光法和竞争性免疫荧光结合流式细胞术(FCM)检测生物学活性。结果:无Etag的Diabody[CD3×Pgp]表达载体经测序证实其序列正确。SDS-PAGE电泳显示2条带,相对分子质量(Mr)分别为25000和26000,与预期Mr相符。去除Etag的Dia-body[CD3×Pgp]与K562/A...

• 出版日期2007
• 单位中国医学科学院; 实验血液学国家重点实验室; 中国协和医科大学