矮生山茶‘恨天高’GA20ox1的克隆及其对转基因烟草株形的影响

作者：王江英; 吴斌; 刘伟鑫; 范正琪; 李纪元

来源：园艺学报, 2015, 42(08): 1523-1532.

DOI：10.16420/j.issn.0513-353x.2014-1045

• 山茶
• 云南山茶
• 矮生
• 基因克隆
• 表达分析
• 转基因烟草

根据山茶(Camellia japonica)同源序列设计特异性引物,利用同源克隆和3′,5′-RACE技术,从云南山茶(C.reticulata)矮生品种‘恨天高’茎尖组织中克隆出GA20–氧化酶(GA20-oxidase,GA20ox)基因,命名为Cr GA20ox1(Gen Bank登录号:KP635268),基因全长1 178 bp,开放阅读框1 146 bp,编码381个氨基酸。实时荧光定量PCR分析发现,GA20ox1在4种不同的山茶中均得到表达,其中乔木类的浙江红山茶(C.chekiangoleosa)GA20ox1表达量最高,其次是岳麓连蕊茶(C.handelii)及金花茶(C.nitidissima),表达量最低的为矮生品种‘恨天高’。结果表明该基因的表达量高低与测试物种的株高有关。GA20ox1在4个物种不同组织中的表达模式基本一致,且在茎尖组织中的表达量均高于叶片。Cr GA20ox1转基因烟草分析结果表明,过表达Cr GA20ox1烟草株高约为野生型的3.6倍,而沉默表达Cr GA20ox1烟草株高约为野生型的一半。

• 单位
  中国林业科学研究院亚热带林业研究所