改进简并PCR法克隆盐生杜氏藻烯醇酶基因

作者：白林含; 乔代蓉; 郑鸣; 徐辉; 李茜; 蒋彦; 杨志荣; 曹毅

来源：北京林业大学学报, 2004, (04): 25-29.

DOI：10.3321/j.issn:1000-1522.2004.04.005

• 盐藻
• 烯醇酶
• 基因克隆
• 简并PCR
• RACE

该文针对基因同源性克隆中存在的问题 ,采用改进简并PCR法对盐生杜氏藻具抗逆功能的烯醇酶基因 .改进后的同源引物简并度从 10 0 0倍以上降低至 10 0倍以下 ,利用RT PCR成功地扩增出一条 6 30bp的盐藻cDNA片段 ,该片段与其他物种的烯醇酶基因具有很高的相似性 .在此基础上进行 5’和 3’RACE获得了盐藻烯醇酶基因的全长cDNA ,其长度为 1734bp .序列分析表明 ,该基因与莱茵衣藻烯醇酶基因的相同性达 83% ,相似性达 89% ,且在进化上与莱茵衣藻的亲缘关系最近 .Southern杂交结果显示 ,该基因在盐藻中可能为单一拷贝

• 出版日期2004
• 单位生命科学学院; 四川大学