拟南芥硫酯酶基因在毕赤酵母中的表达

作者：郝昭程; 王腾飞; 李忠奎; 郝梓凯; 戴琨; 王瑞明

来源：生物工程学报, 2015, (01): 115-122.

DOI：10.13345/j.cjb.140205

• 拟南芥
• 脂酰-ACP硫酯酶
• 毕赤酵母
• 基因重组表达
• 游离中链脂肪酸
• 胞外 Arabidopsis thaliana
• acyl-ACP thioesterase
• Pichia pastoris
• genic recombination expression
• free medium chain fatty acids
• extracellular

硫酯酶在生物体内能催化水解脂酰酰基载体蛋白和饱和脂肪脂酰链,对中链脂肪酸(Medium chain fatty acids,MCFAs)的积累起着关键作用。为获得具有生产中链脂肪酸能力的工程菌,以拟南芥c DNA为模板,PCR扩增得到其脂酰-ACP硫酯酶基因At Fat A,经Eco RⅠ/XbaⅠ双酶切后连接至同样双酶切的质粒中,获得重组质粒p PICZαA-At Fat。将重组质粒电击转入毕赤酵母GS115中,通过Zeocin抗性筛选,挑选出阳性克隆子并摇瓶发酵诱导,SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析获得明显目的蛋白条带,首次成功构建At Fat A的真菌表达系统。气质联用法检测发酵产物胞外游...

• 出版日期2015
• 单位齐鲁工业大学