水痘-带状疱疹病毒糖蛋白E在CHO细胞中的稳定表达

作者：陈哲文; 金于兰; 黄海武; 俞宏杰; 王灿珍; 瞿爱东

来源：中国生物制品学杂志, 2008, (08): 654-657.

• 水痘-带状疱疹病毒
• 糖蛋白E
• CHO细胞
• 表达 Varicella-zoster virus
• Glycoprotein E
• CHO cells
• Expression

目的在CHO细胞中稳定表达水痘-带状疱疹病毒(VZV)糖蛋白E(gE)。方法PCR扩增VZVgE完整胞外结构域编码基因,克隆至哺乳动物细胞表达质粒PSGHVO中,与DHFR选择性基因和脂质体共转染CHO/dhfr-细胞,筛选稳定分泌人生长激素(hGH)和gE融合蛋白的细胞株。采用ELISA和Western blot方法检测细胞培养上清中hGH和gE融合蛋白的表达,并用Ni2+-NTA柱进行纯化。结果gE基因PCR扩增产物和重组表达质粒PSGHVO-gE的双酶切产物经琼脂糖凝胶电泳,均可见1500bp的目的基因条带。转染PSGHVO-gE质粒和DHFR基因的细胞培养上清液经ELISA和Weste...

• 出版日期2008
• 单位上海生物制品研究所有限责任公司