新型鸡痘病毒穿梭载体的构建及其体外表达

作者：刘存霞; 李昌; 王茂鹏; 胡乐鹏; 靖杰; 杜寿文; 尹荣兰; 刘燕瑜; 任静强; 任大勇; 孙丹丹; 金宁一

来源：中国兽医科学, 2012, (05): 454-460.

DOI：10.16656/j.issn.1673-4696.2012.05.003

• 鸡痘病毒
• 穿梭载体
• 表达 fowlpox virus
• shuttle vector
• expression

为构建用于筛选的新型鸡痘病毒载体,采用染色体步移技术对鸡痘病毒282E4株TK基因的下游序列进行测序,并结合扩增出的左右同源重组臂TKL、TKR片段、启动子、MCS及终止信号构建出三表达盒穿梭载体pTKE3。采用基因工程技术将绿色荧光蛋白EGFP基因克隆入3个启动子的下游,构建出pTKE3-A、pTKE3-B、pTKE3-C验证表达盒质粒。结果显示,构建的3个验证质粒分别与鸡痘病毒282E4株共转染鸡胚成纤维细胞,均可在转染12h后观察到绿色荧光。结果表明,构建的三表达盒载体均可成功表达外源基因,这为进一步构建多价重组鸡痘病毒活载体疫苗奠定了基础。

• 出版日期2012
• 单位吉林大学; 中国人民解放军军事医学科学院; 吉林省畜牧兽医科学研究院