过表达circRNA＿079813牙髓干细胞对大鼠牙周骨缺损的影响

作者：周洋; 帕米拉·甫拉提; 刘景^*

来源：中华实用诊断与治疗杂志, 2023, 37(10): 1009-1014.

DOI：10.13507/j.issn.1674-3474.2023.10.008

• circRNA＿079813
• 牙髓干细胞
• 牙周骨缺损
• 成骨分化
• 大鼠

目的 探讨过表达circRNA＿079813的牙髓干细胞(DPSCs)对牙周骨缺损的修复作用及可能机制。方法 对数生长期大鼠DPSCs分为对照组(正常培养基培养)与成骨诱导组(成骨诱导培养基培养),过表达组(转染pcDNA3.1-circRNA＿079813过表达质粒)与空载组(转染pcDNA3.1空载质粒)。50只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、DPSCs组、pcDNA-null组、pcDNA-circ组各10只。模型组、DPSCs组、pcDNA-null组、pcDNA-circ组采用低速球钻在牙槽骨骨面作小切口制作牙周骨缺损模型，分别在缺损区域注入α-MEM培养基、DPSCs、空载组DPSCs、过表达组DPSCs;假手术组仅暴露牙槽骨骨面，不作后续处理。采用碱性磷酸酶(ALP)活性检测试剂盒检测各组DPSCs和各组大鼠牙周缺损骨组织ALP活性，采用实时荧光定量PCR法检测各组DPSCs和各组大鼠牙周缺损骨组织ALP mRNA、circRNA＿079813相对表达量，采用ELISA法检测各组大鼠牙周缺损骨组织白细胞介素(IL)-1β、IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平，采用Western blot法检测各组大鼠牙周缺损骨组织骨形态发生蛋白2(BMP-2)、Runt相关转录因子2(Runx2)、骨钙蛋白(OCN)相对表达量。结果 (1)成骨诱导组ALP活性(5.88±0.19)、ALP mRNA相对表达量(2.19±0.30)均高于对照组(1.00±0.06、1.00±0.09)(t=42.421,P<0.001;t=6.581,P=0.003),circRNA＿079813相对表达量(0.22±0.04)低于对照组(1.00±0.10)(t=12.544,P<0.001)。(2)过表达组ALP活性及ALP mRNA、circRNA＿079813相对表达量(3.25±0.04、9.45±0.52、12.08±0.93)均高于空载组(1.00±0.12、1.00±0.02、1.00±0.10)(P<0.05)。(3)pcDNA-circ组牙周缺损骨组织circRNA＿079813相对表达量(7.06±0.92)均高于假手术组、模型组、DPSCs组、pcDNA-null组(1.00±0.07、1.06±0.25、1.01±0.14、1.02±0.08)(P<0.05),假手术组、模型组、DPSCs组、pcDNA-null组两两比较差异均无统计学意义(P>0.05)。(4)DPSCs组、pcDNA-null组、pcDNA-circ组牙周缺损骨组织ALP活性(1.25±0.18、1.24±0.42、2.15±0.33)、ALP mRNA相对表达量(2.06±0.33、2.03±0.09、4.88±0.71)均高于假手术组(1.00±0.03、1.00±0.11)(P<0.05),模型组(0.28±0.07、0.13±0.02)均低于假手术组(P<0.05);模型组、DPSCs组、pcDNA-null组、pcDNA-circ组牙周缺损骨组织IL-1β(9.22±0.20、6.65±0.89、6.71±0.96、1.98±0.18)、IL-6(5.15±0.42、3.43±0.71、3.40±0.25、2.07±0.05)、TNF-α(8.91±1.02、5.61±0.50、5.59±0.42、3.08±0.27)水平均高于假手术组(1.00±0.03、1.00±0.06、1.00±0.06)(P<0.05);模型组、DPSCs组、pcDNA-null组牙周缺损骨组织BMP-2(0.58±0.10、0.88±0.07、0.86±0.12)、Runx2(0.42±0.01、0.69±0.07、0.71±0.05)、OCN(0.29±0.07、0.83±0.01、0.81±0.03)蛋白相对表达量均低于假手术组(1.00±0.03、1.00±0.03、1.00±0.03)(P<0.05),pcDNA-circ组(2.55±0.07、1.74±0.15、2.01±0.35)均高于假手术组(P<0.05)。pcDNA-circ组牙周缺损骨组织ALP活性、ALP mRNA及BMP-2、Runx2、OCN蛋白相对表达量均高于模型组、DPSCs组、pcDNA-null组(P<0.05),DPSCs组、pcDNA-null组均高于模型组(P<0.05);pcDNA-circ组牙周缺损骨组织IL-1β、IL-6、TNF-α水平均低于模型组、DPSCs组、pcDNA-null组(P<0.05),DPSCs组、pcDNA-null组均低于模型组(P<0.05),以上指标DPSCs组与pcDNA-null组比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 过表达circRNA＿079813的DPSCs可促进大鼠牙周骨缺损修复，可能机制为circRNA＿079813促进成骨分化相关基因表达，抑制炎性反应。

• 出版日期2023
• 单位新疆医科大学第五附属医院