锌依赖的金属蛋白酶1促进巨噬细胞凋亡

作者：李鹏; 何永林; 张继明; 方陈城

来源：细胞与分子免疫学杂志, 2015, (12): 1585-1587+1592.

DOI：10.13423/j.cnki.cjcmi.007575

• 卡介苗
• 锌依赖的金属蛋白酶1(Zmp1)
• 真核表达
• RAW264.7细胞
• 细胞凋亡 BCG
• zinc-dependent metalloprotease1(Zmp1)
• eukaryotic expression
• RAW264
• 7 cells
• apoptosis

目的构建锌依赖的金属蛋白酶1(zmp1)基因的真核表达质粒,探讨其对巨噬细胞凋亡的影响。方法以卡介苗(BCG)基因组DNA为模板,采用PCR法扩增zmp1基因;克隆到真核表达质粒p EGFP-N1的多克隆位点中,构建真核表达质粒p EGFP-N1-zmp1并转染RAW264.7细胞,荧光显微镜观察绿色荧光蛋白表达,实时定量PCR(qRT-PCR)检测zmp1 mRNA的水平;藻红蛋白标记的膜联素Ⅴ/7-氨基放线菌素D(annexinⅤ-PE/7-AAD)双染色结合流式细胞术检测Zmp1蛋白对细胞凋亡影响。结果扩增出zmp1基因;真核表达质粒经过XhoⅠ和Bam HⅠ双酶切及基因测序鉴定构建成功...

• 出版日期2015
• 单位重庆医科大学