气道平滑肌细胞通过TGF-β1/Smad3信号通路调节IL-33的表达参与哮喘

作者：蔡秋景; 张倩; 何学佳; 孙文丽; 郭爱丽; 张楠; 朱薇薇^*

来源：山东大学学报(医学版), 2020, 58(04): 78-83.

• 转化生长因子-β1/Smad3信号通路
• 白细胞介素-33
• 小鼠气道平滑肌细胞
• 哮喘

目的探究小鼠气道平滑肌细胞表达与分泌白细胞介素(IL)-33参与哮喘的信号机制。方法观察不同浓度[0 ng/mL(空白)、1 ng/mL、10 ng/mL、100 ng/mL]TGF-β1组对小鼠气道平滑肌细胞分泌表达IL-33的影响,ELISA法检测各组细胞培养上清液中IL-33的浓度,Western blotting检测各组细胞IL-33的蛋白表达量;观察加入TGF-β1/Smad3信号通路阻断剂(SIS3)后对该过程的抑制作用,分为空白组、预处理TGF-β1组、未预处理SIS3组和预处理SIS3组,ELISA法检测各组细胞培养上清中IL-33浓度,Western blotting检测各组Smad3、pSmad3及IL-33蛋白表达量。结果 ELISA结果表明,空白组、1 ng/mL TGF-β1组、10 ng/mL TGF-β1组和100 ng/mL TGF-β1组的细胞上清IL-33浓度的总体差异有统计学意义(F=106.4,P<0.05);与空白组相比,10 ng/mL TGF-β1组、100 ng/mL TGF-β1组IL-33浓度均不同程度升高(P均<0.008 3);10 ng/mL TGF-β1组IL-33浓度高于1 ng/mL TGF-β1组和100 ng/mL TGF-β1组,差异有统计学意义(P<0.008 3),10 ng/mL TGF-β1组IL-33浓度升高最显著。Western blotting结果表明,空白组、1 ng/mL TGF-β1组、10 ng/mL TGF-β1组和100 ng/mL TGF-β1组细胞内IL-33表达量的总体差异有统计学意义(F=1613.0,P<0.05),各组间差异有统计学意义(P<0.008 3),10 ng/mL TGF-β1组IL-33胞内表达量升高最显著。空白组、预处理TGF-β1组、未预处理SIS3组和预处理SIS3组的细胞上清IL-33浓度的总体差异有统计学意义(F=166.7,P<0.05),与空白组相比,预处理TGF-β1组、未预处理SIS3组、预处理SIS3组IL-33浓度均不同程度升高(P<0.05)。空白组、预处理TGF-β1组、未预处理SIS3组和预处理SIS3组的胞内Smad3、pSmad3、IL-33蛋白表达量的总体差异有统计学意义[(F=4 752.0,P<0.05),(F=4 330.0,P<0.05),(F=2 791.0,P<0.05)];与空白组相比,预处理TGF-β1组、预处理SIS3组中Smad3蛋白、pSmad3蛋白、IL-33蛋白表达均不同程度升高(P<0.05),未预处理SIS3组Smad3蛋白、pSmad3蛋白、IL-33蛋白表达均降低(P<0.05)。结论一定浓度的TGF-β1可刺激小鼠气道平滑肌细胞表达分泌IL-33增多,TGF-β1/Smad3信号通路可调节该过程参与哮喘。

• 出版日期2020
• 单位济南市中心医院; 山东大学