MUC1启动子驱动人钠/碘共转运体基因靶向表达于胰腺癌细胞的研究

作者:周泉波; 陈汝福; 李志花; 潘秋辉; 周嘉嘉; 唐启彬; 陈积圣
来源:中华医学杂志, 2007, 87(39): 2780-2784.
DOI:10.3760/j.issn:0376-2491.2007.39.012

摘要

目的克隆人 Mucin (MUC1)黏蛋白的启动子序列,并研究其驱动人钠/碘共转运体(hNIS)基因在胰腺癌细胞内的靶向性表达功能。方法利用巢式 PCR 方法从人胰腺癌细胞株CAPAN-Ⅱ细胞中扩增出 MUC1启动子。采用基因重组方法构建质粒 pDC316-MUC1/hNIS。采用脂质体转染的方法把 pDC316-MUC1/hNIS 导入到 MUCI 阳性的人胰腺癌细胞株 CAPAN一Ⅱ、PANC-1和MUC1阴性的人宫颈癌细胞株 HeLa,转染后48h 采用 RT-PCR 方法及免疫组化方法检测转染细胞内的 hNIS mRNA 水平和蛋白表达,转染48h 后检测肿瘤细胞内 NIS 对125碘吸收功能。结果扩增的MUC1启动子核心调控区序列与参考序列一致。重组 pDC316-MUC1/hNIS 转染后48h,hNIS 蛋白在CAPAN-Ⅱ、PANC-1细胞阳性表达,而在 Hela 细胞内不表达。pDC316-MUC1/hNIS 转染后仅在CAPAN-Ⅱ、PANC-1细胞内检测到高水平吸碘,分别是 pDC316-MUC1转染组的7和12倍。结论MUC1启动子能驱动 NIS 基因在 MUC1阳性的肿瘤细胞内靶向功能表达,为进一步在体内运用放射碘靶向治疗胰腺癌奠定了基础。

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