蛋白质芯片制作条件的优化

作者:江凌晓; 郭兆彪; 陈泽良; 王津; 王红霞; 俞守义; 杨瑞馥
来源:第一军医大学学报, 2004, (11): 1230-1232.

摘要

目的探讨以醛基化玻片为固相载体制备蛋白质芯片的条件。方法蛋白质用含40%甘油的PBS稀释后点加在醛基化玻片上,室温干燥1 h,4 ℃冰箱保存,经封闭剂封闭,PBS漂洗后,依次加入抗体,反应结果用扫描仪进行扫读。结果以醛基化玻片为固相载体时预点10~15个点后点样均一性较好;点样后4 ℃冰箱保存24~48 h再进行漂洗和封闭处理,所得结果的荧光测量值较高;3% BSA为封闭剂时所得图像的荧光背景值最低;点样量影响荧光信号的强度。结论以醛基化玻片为固相载体制备蛋白质芯片时要预点15~20个点后再正式点样,点样后应4 ℃保存24~48 h再进行漂洗和3% BSA封闭处理。