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虎源猫泛白细胞减少症病毒VP2基因主要抗原表位区的原核表达和蛋白纯化
田丽红
华育平
东北林业大学学报, (06), pp 97-100, 2010-6-25
Summary
利用PCR技术从FPV-HLJ株病毒细胞培养物中扩增VP2基因主要抗原表位区片段VP2’。扩增片段克隆至pMD18-T载体,经核苷酸序列测定确认后,亚克隆于pGEX-6p-1原核表达载体,构建pGEX-6p-VP2’重组原核表达质粒。将该质粒转化至表达菌BL21(DE3)中用IPTG进行诱导表达。表达蛋白采用切胶法纯化,并用SDS-PAGE和Westernblot检测纯化蛋白纯度和抗原特异性。结果表明,VP2基因全长1200bp,编码400个氨基酸。重组菌可表达相对分子量约为66kD的融合蛋白,包括目的蛋白40kD和GST标签26kD。该蛋白以包涵体形式存在,且GST融合蛋白具有良好抗原特异性...
Keywords
猫泛白细胞减少症病毒; VP2基因; 抗原表位; 原核表达; 蛋白纯化; 虎 Feline panleukopenia virus; VP2 gene; Antigenic epitope; Prokaryotic expression; Protein purification; Tigers
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