摘要

目的 探究敲低序列相似性83蛋白质家族成员D(FAM83D)对调节宫颈癌细胞干细胞特性的作用及其机制。方法 收集手术切除的宫颈癌组织及对应癌旁组织,培养宫颈癌细胞株Hela、Siha、C33A及正常宫颈上皮细胞株H8,检测FAM83D及干细胞标志基因Sox2、Oct4的mRNA及蛋白表达水平。对Hela细胞进行分组,转染阴性对照(NC)siRNA、FAM83D siRNA,感染NC shRNA慢病毒、FAM83D shRNA慢病毒,联合使用对照溶剂二甲基亚砜(DMSO)或β-catenin通路激动剂SKL2001,检测FAM83D及干细胞标志基因Sox2、Oct4的mRNA及蛋白表达水平,并采用瘤球形成实验检测肿瘤干细胞特性。结果 宫颈癌组织中FAM83D、Oct4、Sox2 mRNA相对表达水平均明显高于癌旁组织(P<0.001),且宫颈癌组织中FAM83D mRNA与Oct4、Sox2 mRNA相对表达水平均呈负相关(r=-0.351、-0.332,P<0.05)。Hela、Siha、C33A细胞中FAM83D、Oct4、Sox2 mRNA和蛋白相对表达水平均明显高于H8细胞(P<0.05),并且Hela细胞中FAM83D、Oct4、Sox2 mRNA和蛋白相对表达水平均明显高于Siha、C33A细胞(P<0.05)。转染siRNA或感染shRNA慢病毒敲低FAM83D后,Hela细胞的细胞球形成率及Oct4、Sox2、β-catenin mRNA和蛋白相对表达水平均明显降低(P<0.05);联合使用β-catenin通路激动剂SKL2001,Hela细胞的细胞球形成率及Oct4、Sox2 mRNA和蛋白相对表达水平均明显升高(P<0.05)。结论 敲低FAM83D对宫颈癌细胞干细胞特性具有抑制作用,该作用与抑制Wnt/β-catenin通路有关。