黑曲霉硫氧还蛋白的克隆表达纯化及其酶活位点特征分析

作者：王晓慧; 应盛华; 冯明光

来源：菌物学报, 2010, (03): 409-413.

DOI：10.13346/j.mycosystema.2010.03.004

• 定点突变
• 催化活性
• 比浊法 site-directed mutation
• catalytic activity
• turbidimetry

首次从黑曲霉Aspergillus niger全基因组中克隆出黑曲霉硫氧还原蛋白基因AnTrx,并对其编码蛋白的第33-37位保守区的活性位点实施定点突变C34S、C37S及C34S-C37S,获得相应的3个定点突变基因。将野生型AnTrx及其突变子分别在大肠杆菌Escherichia coli中诱导表达,比浊法测定纯化的各表达产物还原牛胰岛素α与β链之间二硫键的活性。结果表明,AnTrx的3个突变体都不表现明显催化活性。当突变型与野生型AnTrx等量混合后,发现突变型AnTrx-C34S可显著提高野生型AnTrx的催化效率,而突变型AnTrx-C37S却无此功能。由此证明,AnTrx活性结构...

• 出版日期2010
• 单位浙江大学