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摘要
背景:据文献报道,胸腺上皮细胞数量减少、功能紊乱是胸腺退化的重要因素之一,可导致胸腺发育、增殖缺陷以及外周T细胞功能障碍。课题组前期研究发现间充质干细胞在体内可以逆转衰老胸腺的结构和功能,具体作用机制尚不清楚。目的:探讨脐带间充质干细胞在体外对衰老胸腺上皮细胞的作用及影响。方法:将200μmol/L过氧化氢分别作用于第4代胸腺上皮细胞24,48,72,96 h,通过CCK8法检测细胞活力,筛选200μmol/L过氧化氢作用72 h为制备衰老模型合适时间。取第4代脐带间充质干细胞,与衰老的胸腺上皮细胞共培养48 h后进行β-半乳糖苷酶染色检测衰老细胞变化;免疫荧光ki-67染色检测细胞增殖活性;流式细胞仪分析细胞周期变化;免疫组织化学染色法检测p53、p21蛋白阳性表达量;RT-PCR检测衰老相关基因p21、p53以及pRb的mRNA表达水平。结果与结论:与模型组相比,脐带间充质干细胞共培养组衰老胸腺上皮细胞β-半乳糖苷酶表达降低,细胞增殖能力升高,G2期细胞减少而S期细胞增多,免疫荧光p53、p21表达降低,p53、p21 mRNA表达水平降低而p Rb mRNA表达水平升高。共培养组β-半乳糖苷酶表达、细胞增殖能力、p53、p21、pRb表达等结果向着对照组趋势靠近。结果表明,脐带间充质干细胞能调控胸腺上皮细胞的衰老相关指标表达,促进胸腺上皮细胞的增殖与分裂,以逆转胸腺上皮细胞的衰老。
