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摘要
目的观察Apelin-13对高糖诱导肾小管上皮细胞-间充质细胞转分化（Epithelial-mesenchymal transition,EMT）的影响并探讨其可能机制。方法用Apelin-13(10-8、10-7和10-6mol/L)预处理HK-2细胞30 min后,用含D-葡萄糖（30 mmol/L）的培养基培养HK-2细胞48 h。免疫荧光检测HK-2细胞中间充质细胞的标志物α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的表达,透射电镜观察HK-2细胞的超微结构,Western-Blot检测上皮细胞的标志物E-钙粘蛋白（E-cadherin）、α-SMA及自噬相关蛋白表达。结果与对照组比较,高糖组的细胞呈现长梭形,细胞间隙明显增宽,E-cadherin蛋白表达显著性下调（t=4.751,P=0.011）,而α-SMA蛋白表达显著上调（t=3.846,P=0.016）,自噬体数量明显增多,Beclin-1、LC3-Ⅱ蛋白表达和LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ的比值均显著增加（t1=5.271,t2=4.695,t3=6.753,P1=0.009,P2=0.012,P3=0.002）,p62表达显著降低（t=4.562,P=0.012）。与高糖组比较,Apelin-13(10-7和10-6mol/L)+高糖与高糖组比较,明显抑制了细胞形态的变化,细胞形态大多数呈椭圆型,E-cadherin蛋白表达显著上调（t1=3.495,t2=4.124,P1=0.019,P2=0.013）,而α-SMA蛋白表达显著下调（t1=4.014,t2=4.283,P1=0.014,P2=0.012）,自噬体数量明显增多,Beclin-1、LC3-Ⅱ蛋白表达和LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ的比值均显著增加（t1=3.487,t2=4.059,t3=5.342,t4=4.271,t5=5.360,t6=5.851,P1=0.018,P2=0.014,P3=0.009,P4=0.011,P5=0.005,P6=0.004）,p62表达显著降低（t1=4.342,t2=3.557,P1=0.012,P2=0.019）。结论 Apelin-13抑制了高糖诱导的肾小管EMT,其机制可能与Apelin-13诱导肾小管上皮细胞自噬有关。
