摘要

目的:运用去污剂及核酸酶法制备兔脱细胞髓核支架,体外评价该支架的形态学及细胞毒性改变,探讨其作为组织工程髓核支架的可行性。方法:取健康成年新西兰大白兔髓核组织50枚,随机分为新鲜对照组(n=25)和脱细胞组(n=25),后者用0.3%TritonX-100+0.5%脱氧胆酸钠联合核酸酶进行脱细胞处理24 h,通过肉眼观、病理染色及扫描电镜观察髓核形态改变、细胞脱除和细胞外基质变化情况,并取兔骨髓间充质干细胞为对象,运用CCK-8法及死活细胞染色法在体外评价该支架的细胞毒性。结果:髓核脱细胞支架形态保持良好,细胞清除彻底,细胞外胶原基质结构破坏较小,与正常髓核相比,支架组织及其浸提液对兔骨髓间充质干细胞无明显毒副作用。结论:TritonX-100与脱氧胆酸钠联合核酸酶可有效脱除髓核细胞成分,较好地保留细胞外基质结构,且该支架对骨髓间充质干细胞无明显毒副作用,可以作为髓核组织工程研究的理想材料。

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