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摘要
背景:大鼠骨髓胚胎样干细胞能表达胚胎干细胞标志物,能够分化形成三胚层来源细胞,并且植入机体后能改善心功能、组织心室重构,但是对于骨髓胚胎样干细胞的生物学特性及分化潜能尚不完全知晓。目的:分析大鼠骨髓胚胎样干细胞生物特性和分化潜能。方法:20只SD大鼠,采用阶段特异性胚胎抗原1(SSAE-1)标记骨髓单核细胞,利用流式细胞仪分选骨髓胚胎样干细胞。采用电镜扫描观察骨髓胚胎样干细胞形态、结构;免疫荧光化学染色测定胚胎干细胞转录因子(Oct4、Nanog、Sox2)在骨髓胚胎样干细胞中的表达,将骨髓胚胎样干细胞放入纤维细胞饲养层进行扩增,诱导心肌和内皮细胞,测定其特异蛋白表达。结果与结论:(1)采用SSEA-1标记大鼠骨髓胚胎样干细胞,对直径为2-6μm细胞设门,大鼠骨髓胚胎样干细胞呈现纺锤形,多边形以及圆形多细胞形态;体积较小;(2)透射电镜下可见细胞核增大,细胞质较少,含有少量的细胞器。(3)第2代大鼠骨髓胚胎样干细胞免疫细胞化学染色下能测定到多潜能抗原标志;随传代次数增加,细胞增殖能力出现下降趋势;(4)大鼠骨髓胚胎样干细胞分化1周后心肌细胞平行排列,诱导2周后细胞形态发生明显的变化,细胞相互连接。免疫荧光化学染色可见心肌特异蛋白cTnT以及Cx43表达;大鼠骨髓胚胎干细胞分化1周后内皮细胞呈现多角形、梭形。诱导2周后细胞相互连接,免疫细胞化学染色可见内皮细胞特异蛋白VWF以及CD31表达。(5)结果提示:大鼠骨髓胚胎样干细胞具备与骨髓间充质干细胞类似的生物学特性,能表达干细胞转录因子,能够在一定的条件下分化为心肌细胞和内皮细胞,具有较高的临床应用价值。
- 出版日期2017
- 单位吉林大学; 基础医学院; 白城医学高等专科学校
