脑心肌炎病毒VP1蛋白酵母双杂交诱饵载体的构建及验证

作者：谢晶莹; 冯若飞; 徐雷; 张海霞; 李向茸; 侯兰新; 马忠仁

来源：生物技术通报, 2015, (01): 198-202.

DOI：10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2015.01.030

• 脑心肌炎病毒
• VP1蛋白
• 酵母双杂交
• 诱饵蛋白 encephalomyocarditis virus
• vp1 protein
• yeast two-hybrid
• bait

为筛选与脑心肌炎病毒VP1蛋白相互作用的靶细胞cDNA文库蛋白,构建VP1蛋白的诱饵载体pDHB1-VP1。扩增EMCV的VP1基因并克隆至pMD18-T载体中,经测序验证正确后定向克隆至酵母双杂交诱饵载体pDHB1。将重组pDHB1-VP1载体进行酶切验证和测序分析,并转化酵母报告菌株NMY51,检测其在酵母细胞中有无表达和自激活作用。结果表明,构建的p DHB1-VP1基因可以在酵母细胞中正确表达,产物大小约66 kD,而且可以与兔抗EMCV血清发生特异性结合,有较好免疫原性。成功构建了诱饵载体pDHB1-VP1,可以在酵母细胞中表达且其对报告基因无自激活作用,可以应用于酵母双杂交筛选试验...

• 出版日期2015
• 单位西北民族大学; 甘肃省动物细胞工程技术研究中心