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摘要
研究旨在制备一种针对QX型传染性支气管炎病毒（Infectious bronchitis virus,IBV）的病毒样颗粒（Virus-like particle,VLP）疫苗并对其免疫保护效果进行初步评价。试验首先构建了分别表达QX型IBV S蛋白（QXLS）、M蛋白（QXLM）和E蛋白（QXLE）的三种重组杆状病毒rBacmid-QXLS、r Bacmid-QXLM和rBacmid-QXLE，并通过间接免疫荧光试验（IFA）和Western blot鉴定目的蛋白的表达；进一步将3种重组杆状病毒通过适当比例共感染Sf9细胞获得VLP，经蔗糖密度梯度离心纯化后使用透射电子显微镜观察鉴定VLP的组装效果；最后将纯化的VLP与氢氧化铝佐剂混合制成疫苗免疫SPF鸡进行免疫保护效果评价。结果显示：S、M和E三种目的蛋白均能成功表达，透射电子显微镜观察可见组装形成的VLP呈现典型的椭圆形病毒样结构，直径为80～120 nm；单独VLP疫苗免疫具有一定的免疫保护效果，QXL87+VLP疫苗联合免疫保护效果较好，可有效减轻临床病变、降低气管和泄殖腔排毒量及组织器官载毒量。研究表明，试验已经成功制备出QX型IBV VLP，且具有良好的免疫原性，为后续进一步研制基于VLP技术的QX型IBV基因工程疫苗奠定了基础。
- 出版日期2023
- 单位扬州大学
