抗冷冻蛋白Ⅲ对玻璃化冷冻猪GV期卵母细胞及其DNA的保护作用

作者:董胤余; 王勇杰; 刘可可; 王欣雨; 唐非台; 杜倩笙; 王晓丽*
来源:中国兽医科学, 2023, 53(05): 658-663.
DOI:10.16656/j.issn.1673-4696.2023.0100

摘要

为了寻找冷冻液中最适合的抗冷冻蛋白Ⅲ(AFPⅢ)添加浓度,并探索AFPⅢ对玻璃化冷冻卵母细胞、活性氧(ROS)及其DNA损伤的保护作用进行评价。本研究分别在冷冻液中添加250、500、750、1 000、1 200 ng/m L AFPⅢ,通过冷冻液处理和冷冻-复苏筛选出最合适的AFPⅢ添加浓度,荧光探针检测卵母细胞中活性氧的含量,彗星电泳检测卵母细胞DNA的变化。结果显示,冷冻液中添加500 ng/m L AFPⅢ对玻璃化冷冻猪GV期卵母细胞的保护效果最佳;冷冻液中添加AFPⅢ的冷冻组ROS含量显著低于冷冻对照组(P<0.05);添加AFPⅢ的冷冻组尾部DNA百分比(Tail DNA%)和Olive尾矩值(OTM)显著低于冷冻对照组(P<0.05)。结果表明,AFPⅢ可以提高玻璃化冷冻后卵母细胞的体外发育能力,降低冷冻-复苏后卵母细胞ROS含量,缓解玻璃化冷冻引起的卵母细胞DNA损伤。

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