摘要

构建MsDREB1基因的原核表达载体,对表达产物进行鉴定和纯化,为研究DREB1基因在植株中功能奠定基础。用冷酚法从紫花苜蓿提取RNA,并转化成cDNA,然后将其克隆至pET32a原核表达载体,构建重组载体pET32aDREB1。用重组质粒转化大肠杆菌BL21,IPTG诱导表达后进行SDS-PAGE分析,用Ni-NTA亲和层析柱对重组蛋白进行纯化。结果表明,原核表达载体构建正确;SDS-PAGE分析,出现了与DNAMAN预测的43.2 kd大小一致的蛋白条带;经分析重组蛋白纯化率达到90%以上。

  • 出版日期2014
  • 单位黄淮学院

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