H3亚型流感重组腺病毒候选疫苗的构建及鉴定

作者:温树波; 谭磊; 赵权; 任静强; 靖杰; 孙文超; 阎富龙; 张丹; 鲁会军; 金宁一
来源:中国病原生物学杂志, 2013, (08): 673-676+749.
DOI:10.13350/j.cjpb.2013.08.009

摘要

目的研制一种制备工艺简单、无需鸡胚即可大量生产的预防季节性H3亚型流感重组腺病毒候选疫苗。方法构建含有外源H3HA基因的重组腺病毒穿梭载体质粒pacAd5-H3HA,并用酶切的方法进行鉴定;将鉴定阳性的pacAd5-H3HA与腺病毒骨架载体质粒线性化后用脂质体介导共转染HEK293细胞,分别采用RT-PCR、间接免疫荧光试验以及Western blot方法对构建的H3亚型流感重组腺病毒疫苗进行鉴定。结果 RT-PCR扩增出约1.8kb片段,与目的片段大小相同,表明外源基因H3HA成功插入重组腺病毒。间接免疫荧光试验显示重组腺病毒转染后的HEK293细胞中检测到特异性蛋白,Western blo...

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