单组分妥布霉素工程菌的构建

作者：肖剑萍; 温淑平; 洪文荣

来源：中国抗生素杂志, 2014, (12): 891-895.

DOI：10.13461/j.cnki.cja.005456

• 黑暗链霉菌
• 安普霉素
• 妥布霉素
• 工程菌 Streptomyces tenebrarius
• Apramycin
• Tobramycin
• Engineering bacteria

目的阻断黑暗链霉菌中安普霉素和氨甲酰妥布霉素的合成,构建主产妥布霉素工程菌。方法以安普霉素生物合成基因apr J为靶标,克隆其上下游序列作为同源交换臂,构建重组质粒p XJ401,利用接合转移技术将其导入黑暗链霉菌Tt-49,获得工程菌TX302,并在此基础上敲除氨甲酰基转移酶基因tob Z,获得工程菌TX308。采用MS法,检测工程菌次级代谢产物的变化。结果 TX302主产氨甲酰妥布霉素,未检测到安普霉素。TX308不再合成氨甲酰妥布霉素,产物只检测到妥布霉素。结论磷酸变位酶基因apr J是安普霉素生物合成的关键基因,敲除后能有效阻断安普霉素的合成,工程菌TX308大量积累妥布霉素,不再合成...

• 出版日期2014
• 单位福州大学