基于0507蛋白的山羊支原体山羊肺炎亚种抗体间接ELISA检测方法的建立

作者：李梦磊; 张锐铮; 于皓同; 张琪; 许信刚^*

来源：动物医学进展, 2023, 44(09): 1-5.

DOI：10.16437/j.cnki.1007-5038.2023.09.019

• 山羊支原体山羊肺炎亚种
• 0507蛋白
• 酶联免疫吸附试验
• 抗体检测

为建立山羊支原体山羊肺炎亚种(Mycoplasma capricolum subsp.capripneumoniae,Mccp)抗体检测方法，对Mccp的0507基因进行克隆与载体构建，通过原核表达技术制备重组0507蛋白，建立Mccp抗体间接ELISA检测方法，验证该方法的特异性、灵敏性与重复性，并对临床收集的血清样品进行检测。结果显示，重组0507蛋白大小为39 ku, Western blot证明重组0507蛋白具有良好的反应原性；建立的ELISA检测方法抗原包被量为3μg/mL,血清稀释倍数为1∶200,酶标二抗稀释倍数为1∶2 500,阴阳临界值为0.221。用该方法对山羊流产衣原体、立克次氏体与牛支原体的阳性血清进行检测，结果均为阴性；Mccp阳性血清最大稀释倍数为1 024倍；批内、批间变异系数均小于10%。对陕西省部分羊场收集到的282份血清进行检测，Mccp阳性率为13.1%。该研究建立了一种检测Mccp抗体间接ELISA检测方法，为Mccp的实验室诊断和流行病学调查提供了技术支持。

• 出版日期2023
• 单位西北农林科技大学