青蒿琥酯对人Tenon囊成纤维细胞自噬的影响

作者：陈静; 罗高权; 陈艺

来源：实用医学杂志, 2021, 37(16): 2069-2074.

• 青蒿琥酯
• 人Tenon囊成纤维细胞
• 增殖
• 自噬
• 青光眼

目的观察青蒿琥酯(Art)对人Tenon囊成纤维细胞(HTFs)自噬的影响,探讨Art阻止HTFs增生机制。方法体外培养HTFs,实验分为空白对照组和不同浓度(50、100、150、200μg/mL)Art实验组,给药24 h和48 h后噻唑蓝(MTT)法检测HTFs活性。48 h后采用逆转录定量PCR(qRT-PCR)和蛋白免疫印迹(Western Blot)法检测微管相关蛋白1轻链3(LC3)-II、自噬相关蛋白Beclin-l m RNA和蛋白的相对表达水平。选用150μg/mL Art处理HTFs 48 h,采用Cyto-ID染色法检测HTFs自噬水平,对Cyto-ID染色阳性的细胞数量进行检测,并与空白对照组进行比较。结果 MTT法结果显示:Art抑制HTFs增殖(均P <0.05),且存在一定的浓度和时间依赖性,随着浓度升高和时间延长,其抑制率由4.7%增至68.6%。qRT-PCR法结果显示:不同浓度Art作用48 h后,LC3-II和Beclin-l mRNA的相对表达量增加,分别从(1.367±0.214)升至(4.765±0.371),(1.235±0.164)升至(3.487±0.356),各组间差异均有统计学意义(FL=20.920,P <0.01;FB=26.370,P <0.01)。Western Blot结果显示:不同浓度Art作用48 h后,LC3-II和Beclin-l蛋白的相对表达量增加,分别从(0.101±0.025)升至(0.808±0.102),(0.098±0.036)升至(0.784±0.064),各组间差异均有统计学意义(FL=32.852,P <0.01;FB=29.874,P <0.01)。Cyto-ID染色结果显示:150μg/mL Art作用48 h后,HTFs自噬阳性细胞的比例由空白对照组的(13.302±2.301)%上升至(53.274±7.851)%,差异有统计学意义(t=8.804,P <0.01)。结论 Art有效促进HTFs中LC3-II、Beclin-l mRNA和蛋白的表达,提高细胞自噬水平,抑制细胞增殖。

• 出版日期2021
• 单位广州医科大学附属第三医院; 中国人民解放军南部战区总医院