青蒿α-bisabolol合酶产物绝对构型的确定

作者：穆星; 杨倩; 刘会云; 向英; 曹飞; 李振秋^*

来源：河北大学学报(自然科学版), 2020, 40(04): 409-414.

• 没药醇合酶
• 倍半萜
• 青蒿
• 立体异构体
• α-没药醇

建立气相和液相色谱方法用于鉴定α-没药醇(α-bisabolol)绝对构型,确定青蒿α-bisabolol合酶产物的绝对构型.手性液相方法分离并制备α-bisabolol的4种立体异构体,结合旋光度测定、气相色谱和标准品确定4种立体异构体的绝对构型.分别建立气相和液相色谱2种方法来鉴定α-bisabolol的4种立体异构体混合物.化学合成酶促反应的底物法尼基焦磷酸(farnesyl pyrophosphate,FPP),原核表达、蛋白纯化后进行体外催化,鉴定2个α-bisabolol合酶体外催化产物α-bisabolol的绝对构型.甜舌草α-bisabolol合酶(Lippia dulcis bisabolol synthase,LdBOS)体外催化FPP,产物构型为(+)-epi-α-bisabolol,与文献报道一致.青蒿α-bisabolol合酶(Artemisia annua bisabolol synthase,AaBOS)体外催化FPP生成的产物为(+)-α-bisabolol.Agilent CP-Chirasil-Dex-CB气相色谱柱和Chiralpak IA液相色谱柱可分别用以分离、鉴定α-bisabolol的4种手性异构体.AaBOS和LdBOS的催化产物6位碳构型相同,暗示这2种酶与青蒿紫穗槐二烯合酶(Artemisia annua amorpha-4,11-diene synthase,AaADS)的催化机理类似.利用气相和液相色谱的方法分析手性化合物,具有灵敏度高、稳定性强、简便易行等优点.手性化合物α-bisabolol绝对构型的分离、鉴定,在医药、食品和化工领域具有重要意义.

• 出版日期2020
• 单位河北大学; 生命科学学院