摘要

诱导细胞凋亡DFF45样效应子a (cell death inducing DNA fragmentation factor 45 like effector a,CIDEa)是一类和脂类代谢紧密相关的蛋白,参与调控脂解、脂滴的生长融合和极低密度脂蛋白的成熟。为研究CIDEa基因在奶山羊(Capra hircus)乳腺上皮细胞中的生物学功能,本研究利用qPCR技术检测CIDEa在奶山羊泌乳期和干奶期乳腺组织的表达差异;采用siRNA介导的干扰技术研究CIDEa基因对脂质合成和相关基因表达的影响。结果发现,CIDEa基因在泌乳期乳腺组织的表达量显著高于干奶期(P<0.05)。利用siRNA介导的干扰技术,在奶山羊乳腺上皮细胞中转染siRNA,CIDEa基因mRNA水平下调60%~88%(P<0.01);干扰CIDEa,抑制了细胞中脂滴积累,显著降低细胞中甘油三酯含量(P<0.05);CIDEa干扰后,显著上调脂肪酸合酶(fatty acid synthase, FASN)和激素敏感脂酶(hormone-sensitive lipase,HSL)基因的表达(P<0.05),同时促进固醇调节元件结合蛋白1 (sterol regulatory element binding proteins1, SREBP1)基因的表达(P<0.05),并且抑制脂肪酸结合蛋白3 (fatty acid-binding protein 3, FABP3)和二酰基甘油酰基转移酶1(diacylglycerol acyltransferase 1, DGAT1)基因的表达(P<0.05)。研究结果表明,CIDEa基因在奶山羊乳腺上皮细胞中促进脂滴合成,本研究为进一步研究CIDEa调控奶山羊乳脂合成的作用机制提供理论依据。